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      離心分離樣品梯度(du)回收方法之(zhi)一---傾倒法

      時間:2018/8/6 17:12:36 來源:本站原創 點擊:6144

      离心分离样品梯度(du)回收方法之(zhi)一---倾倒法

          用凯达离心机分离样品结束后(hou),必须收集(ji)梯度(du)中的样品以便进一步分析(xi),因此需要(yao)对梯度(du)进行分级取样,在(zai)分级过(guo)程中要(yao)保护(hu)离心时得到(dao)的分离度(du)。一般有直(zhi)接收集(ji)和(he)连(lian)续收集(ji)。
      下面介绍直(zhi)接回收区(qu)带之(zhi)倾倒法
      该方法适用于差速离心。普通的離心沉(chen)澱或差速離心後(hou),懸(xuan)浮液(ye)就(jiu)簡(jian)單地分為上清液(ye)與沉(chen)澱兩個(ge)部分。所謂傾倒法就(jiu)是將上清液(ye)傾倒出來,使上清液(ye)與沉(chen)澱分開,從上清液(ye)或沉(chen)澱中取得所要(yao)求收取的樣品部分。該法的特點是簡(jian)單、快捷、方便。

      在(zai)这种(zhong)直(zhi)接取沉(chen)淀或上清液(ye)的中,如果形(xing)成的沉(chen)淀不“密实”,倾出上清液(ye)时,沉(chen)淀有时也会被倒出,有时沉(chen)淀与上清液(ye)发生(sheng)重新混合。为了使上清液(ye)与沉(chen)淀分得清楚,可用提高转速、增(zeng)加离心力(li)的方法使沉(chen)淀聚结得密实。这种(zhong)做(zuo)法有时往(wang)往(wang)并不可行,如果离心力(li)过(guo)高,样品在(zai)上清液(ye)中会造成失(shi)去(qu);如果样品存在(zai)于沉(chen)淀中,过(guo)分结实的沉(chen)淀可能会造成部分样品的不可逆聚集(ji)、黏结,不能重新分散悬(xuan)浮;当转速高、离心力(li)很大时,大分子间的内(na)力(li)受到(dao)影响如氢键作用等,样品在(zai)离心管底(di)部形(xing)成坚硬(ying)的饼(bing)块。这种(zhong)情况(kuang)下要(yao)根(gen)据样品中杂质存在(zai)的形(xing)式、结构组成、s值(zhi)大小来设置(zhi)选择转速。倾倒上清液(ye)时应该顺沉(chen)淀形(xing)成的位置(zhi),倾倒时动作应该尽量(liang)地稳、尽量(liang)避免摇(yao)晃。如下图(如果沉(chen)降不够(gou)密实,尽可能用吸管吸出上清液(ye))。

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